前两天群里有个做糕点的老哥发牢骚,说送检的样品菌落总数又超了,自己拿平板数了半天愣是没对上检验院的数。底下好几个同行跟着冒泡,说这玩意儿看着简单,真上手算起来头大。
先别急着背公式,稀释倍数先搞对
菌落数计算公式说白了就一句话:f=ad*a。但问题是,a这个稀释倍数你搞对了吗?
我见过有人把10倍稀释和100倍稀释的平板放一起数,数完直接懵。师傅当时跟我说,取样接种量是多少毫升、稀释了几轮,这两个数错一个,后面全白算。
平板菌落计数法本身不复杂,样品适当稀释,微生物散成单个细胞,取一定量涂布到平板上,培养完统计菌落数,再按稀释倍数和取样接种量换算。听着顺,做起来坑不少。
数平板这事儿,眼睛和手都得稳
培养条件一般是36℃、48小时,培养基用PCA。计数有效范围30到300CFU/皿,低于30或者高于300,这皿基本就废了,得重新来。
有个做质检的姐们跟我说,她刚开始数的时候老把针尖大的小菌落漏掉,后来换了菌落计数器才省心点。不过她也提醒,计数器是辅助,边缘那种蔓延菌落还是得靠眼睛判断,机器有时候也犯迷糊。
大肠菌群那边更麻烦,VRBA培养基,36℃培养24小时,计数范围15到150CFU/皿,而且还得做证实实验才能最终计数。不是说你数完就完事了。
菌落总数不等于所有细菌数
这点得说清楚。国标方法规定的是需氧条件下、37℃培养48小时、普通营养琼脂平板上能长出来的菌落总数。厌氧菌、微需氧菌、有特殊营养要求的、非嗜中温的,这些条件满足不了,人家根本长不出来。
所以菌落总数有时候被叫杂菌数、需氧菌数,它不区分细菌种类,也不代表实际所有细菌的总数。只能用来判定食品被污染的程度和卫生质量,反映生产过程中符不符合卫生要求。
洁净手术室那边标准更细,I级手术区0.2个/30分、直径90mm培养皿5个/立方米,周边区翻倍。到了Ⅳ级,手术区和周边区都是5个/30分、175个/立方米。等级不同,要求差得远。
衣原体菌落数正常值标准是小于五百,但不同医院设备不一样,正常值也有出入。建议去正规医院查,仪器相对靠谱些。
行业里有个妥协点得提一下:菌落总数高不代表一定有害,低也不代表相对安全。它就是个卫生学评价的参考指标,具体还得结合其他检测一起看。别自己吓自己,也别不当回事。
